大肠杆菌（E. coli）宿主细胞蛋白测定是指在重组蛋白生产过程中对大肠杆菌表达系统中残留的非目标蛋白（即宿主细胞来源的杂蛋白）进行定性和定量检测的关键分析步骤。这一过程对确保生物制品安全性、纯度和一致性具有重要意义。在生物药物开发、疫苗生产以及其他重组蛋白制备环节中，大肠杆菌因其遗传背景清晰、生长迅速、表达量高等优势被广泛采用作为表达宿主。然而在细胞破碎与蛋白提取过程中，除目标蛋白外仍有大量大肠杆菌自身蛋白被同时释放，若不严格清除可能引发免疫反应或干扰药效。因此，大大肠杆菌（E. coli*）宿主细胞蛋白测定不仅是工艺开发与质量控制的环节，更是生物标志物药物开发中保证产品安全性与规范性的一环。在生物标志物药物开发过程中，尤其是在采用大肠杆菌表达系统生产重组蛋白药物时，宿主细胞蛋白（Host Cell Proteins, HCPs）的残留控制直接关系到产品的临床可用性与监管合规性。HCPs作为一种过程相关杂质，其组成复杂、浓度低、变异大，若未能准确检测与控制，可能导致免疫原性风险增加，甚至影响新药审批进度。因此，开展系统化、精准化的大肠杆菌（E. coli）宿主细胞蛋白测定是实现生物标志物药物开发高质量推进的技术保障。

当前，大肠杆菌（E. coli）宿主细胞蛋白测定主要采用两大类技术路径：一是免疫学方法，如ELISA（酶联免疫吸附试验），其依赖于抗大肠杆菌HCP抗体库对蛋白混合物中的杂蛋白进行识别与定量，适用于高通量初筛与常规质量控制；二是高分辨率质谱方法，特别是基于液相色谱-质谱联用（LC-MS/MS）的定量蛋白质组学策略，它可在无抗体依赖的情况下实现单蛋白水平的精准检测，全面解析HCP组成，尤其适合复杂工艺开发与法规申报材料准备中对HCP成分提出具体要求的项目。这类质谱方法不仅适用于目标蛋白表达系统的工艺优化，还为后续的生物标志物药物开发提供了蛋白质背景的基础数据。*

相较而言，免疫学方法虽然通量高、操作简便，但抗体覆盖率受限，难以识别低丰度或结构异常的宿主蛋白。而质谱方法则具备覆盖广、灵敏度高、分子级别定性的优势，尤其在多批次产品一致性评价与风险蛋白追踪方面显示出独特价值。因此，在实际应用中，通常将二者结合使用：初期采用ELISA进行批次监测，后续通过质谱验证关键HCP的存在与动态变化建立更为完善的大肠杆菌（E. coli）宿主细胞蛋白测定体系。这种多技术协同的策略已成为生物标志物药物开发中保障蛋白纯度和质量一致性的主流方案。*

实验流程方面，大肠杆菌（E. coli）宿主细胞蛋白测定通常包括蛋白提取、样本消化、目标蛋白去除（如通过免疫沉淀或亲和纯化）、非靶蛋白富集、质谱分析与数据解读等步骤。通过对比表达产物与阴性对照中HCP谱系的差异可以识别出关键风险蛋白，构建风险评估模型，并为工艺优化提供定量依据。在后续药物临床阶段，这一测定体系还能为批间一致性评价、药物稳定性分析以及伴随诊断工具开发提供技术支持，构成生物标志物药物开发中至关重要的质量数据基础。*

百泰派克生物科技提供高质量的蛋白测定服务，我们能够为客户提供涵盖方法开发、蛋白鉴定、风险评估与定量分析的一站式服务。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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